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      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒

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      • 文件类型:Word文档
      • 文件大小:0.06M
      • 更新日期:2016-07-24 23:28
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      详细介绍
       本试剂盒只能用于科学研究不得用于医学诊断

       

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒使用说明书

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 试剂盒名称】

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 试剂盒用途】

      定量小鼠血清、血浆及相关液体样本中抗透明带抗体(aZP) 的含量

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒检测原理】

      本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被抗透明带抗体(aZP) 透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中抗透明带抗体(aZP) 浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中抗透明带抗体(aZP) 含量。

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 试剂盒组成】

      1

       

      酶标包被板

      12孔×8条

      7

      底物夜A

      6mL

      2

       

      标准品:200ng/ml

      0.6mL

      8

      底物夜B

      6mL

      3

       

      20倍浓缩洗涤液

      20mL

      9

      终止液

      6mL

      4

       

      标准品稀释液

      6mL

      10

      说明书

      1份

      5

       

      样本稀释液

      6mL

      11

      封板膜

      1张

      6

       

      酶标试剂

      6mL

      12

      密封袋

      1个

      备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材

      1、37℃恒温箱

      2、 标准规格酶标仪

      3、 移液器及一次性吸头

      4、 蒸馏水

      5、 一次性试管

      6、 吸水纸

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒操作步骤】

      1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。

      2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

      3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。

      4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

      5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

      6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。

      7、温育:重复4的操作。

      8、洗板:重复5的操作。

      9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。

      10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。

      11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。

      12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 样本要求】

      1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。

      2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

      3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒注意事项】

      1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

      2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

      3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。

      4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。

      5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本终浓度。

      6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。

      7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。

      8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。

      9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

       

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒操作程序总结】

      准备试剂,样品和标准品 

       

      加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟

       

      洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟

       

      洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟

       

      加入终止液

       

      15分钟之内读OD

       

      计算

       

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒检测范围

      0.1-200ng/ml

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒规格】

      96T/盒、48T/盒

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒贮藏】

      2-8℃,避光防潮保存。

      小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒有效期】

      6个月

       
       
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